Храм Вознесения Господня на валах в Ростове возведен в 1566 году по указу Ивана IV Грозного. Он построен в честь первого на Руси блаженного — Исидора Ростовского, поэтому его часто называют церковью Исидора Блаженного.
История блаженного описана в житие. Он родился в католической семье в окрестностях немецкого города Бранденбурга. Исидор принял подвиг юродства и дошел пешком до Ростова. Здесь он вел аскетичный образ жизни, построил себе шалаш из деревянных прутьев и прославился как чудотворец.
После смерти блаженного на месте его могилы построили деревянную церковь. А уже Иван Грозный распорядился возвести здесь каменное здание. Мощи Исидора Ростовского и сегодня хранятся в храме Вознесения Господня.
Построил церковь архитектор Андрей Малой, который известен своими проектами для Ивана Грозного в Москве. Поэтому храм напоминает старинные столичные церкви. В то же время для него характерна симметрия — черта итальянского зодчества той эпохи. Еще здесь сохранилась фресковая живопись 1720-х годов. В храме можно увидеть изображения ростовских зданий, сцены из жития Исидора Блаженного. В конце XVIII — начале XIX века к церкви пристроили трапезную и колокольню в стиле классицизма.
В советское время храм закрыли, превратили его в склад. Уже в 1930 году церковь передали Ростовскому кремлю для устройства музея. В 1950-х здание отреставрировал архитектор Лев Давид. В 2000 году церковь вернули верующим и продолжили работы по ее восстановлению.